محیط کشت tsi

محیط کشت تریپل شوگر آیرون آگار

محیط کشت تریپل شوگر آیرون آگار (TSI)

محیط کشت تریپل شوگر آیرون آگار یا به اختصار TSI، یک محیط کشت افتراقی است که به طور گسترده در میکروبیولوژی برای شناسایی و افتراق باکتری‌های گرم منفی از خانواده انتروباکتریاسه استفاده می‌شود. این محیط کشت به ما امکان می‌دهد تا توانایی باکتری‌ها در تخمیر قندهای مختلف (گلوکز، لاکتوز و ساکروز) و تولید گاز و سولفید هیدروژن را بررسی کنیم.

محیط کشت Triple Sugar Iron

اجزای تشکیل دهنده محیط کشت TSI

• قندها: گلوکز، لاکتوز و ساکروز

• پپتون: منبع نیتروژن و انرژی

• تیوسولفات سدیم: برای تشخیص تولید سولفید هیدروژن

• سولفات آهن: برای واکنش با سولفید هیدروژن و تشکیل رسوب سیاه

• فنل رد: شاخص pH برای تشخیص تغییر pH محیط به دلیل تخمیر قندها

• آگار: عامل جامد کننده

محیط کشت tsi agar

نحوه عمل

• تخمیر قندها: اگر باکتری بتواند یکی از قندهای موجود در محیط را تخمیر کند، اسید تولید می‌شود که باعث تغییر رنگ محیط از قرمز به زرد می‌شود.

• تولید گاز: برخی باکتری‌ها در حین تخمیر قندها، گاز تولید می‌کنند که باعث ایجاد حباب در محیط می‌شود.

• تولید سولفید هیدروژن: اگر باکتری بتواند تیوسولفات سدیم را احیا کند، سولفید هیدروژن تولید می‌شود که با یون آهن واکنش داده و رسوب سیاه رنگی ایجاد می‌کند.

تفسیر نتایج

نتایج حاصل از کشت در محیط TSI به صورت زیر تفسیر می‌شوند:

• تخمیر گلوکز، لاکتوز و ساکروز: اگر کل محیط زرد رنگ شود، نشان‌دهنده تخمیر هر سه قند است. اگر فقط قسمت عمقی محیط زرد رنگ شود و قسمت سطحی قرمز شود، نشان‌دهنده تخمیر فقط گلوکز است. اگر قسمت سطحی زرد رنگ شود، نشان‌دهنده تخمیر لاکتوز یا ساکروز یا هر دو است.

• تولید گاز: وجود حباب در محیط نشان‌دهنده تولید گاز است.

• تولید سولفید هیدروژن: تشکیل رسوب سیاه در عمق محیط نشان‌دهنده تولید سولفید هیدروژن است.

محیط کشت تی اس ای

کاربردهای TSI

• تشخیص باکتری‌های روده‌ای: TSI برای افتراق بین گونه‌های مختلف باکتری‌های روده‌ای مانند اشریشیا کلی، سالمونلا و شیگلا استفاده می‌شود.

• تعیین توانایی تخمیر قندها: با استفاده از TSI می‌توان توانایی باکتری‌ها در تخمیر قندهای مختلف را تعیین کرد.

• تشخیص تولید گاز و سولفید هیدروژن: این محیط کشت به ما امکان می‌دهد تا توانایی باکتری‌ها در تولید گاز و سولفید هیدروژن را بررسی کنیم.

نکات مهم

• آماده‌سازی: محیط کشت TSI باید به صورت شیب‌دار در لوله‌های آزمایش ریخته شود.

• انکوباسیون: لوله‌های کشت شده در دمای 35-37 درجه سانتی‌گراد به مدت 18-24 ساعت انکوبه می‌شوند.

• تفسیر نتایج: تفسیر نتایج باید با توجه به سایر آزمایش‌های بیوشیمیایی انجام شود.