محیط کشت اورنج سرم آگار

محیط کشت اورنج سرم آگار (Orange Serum Agar, OSA) یک محیط کشت غنی شده و انتخابی است که به طور ویژه برای کشت و شمارش مخمرها، به خصوص در صنایع غذایی و لبنی، طراحی شده است. این محیط حاوی مواد مغذی و عوامل انتخابی است که رشد مخمرها را تقویت کرده و رشد باکتری‌ها را مهار می‌کند.

ترکیبات و عملکرد

• سرم پرتقال: منبع غنی از ویتامین‌ها، مواد معدنی و عوامل رشد برای مخمرها است.

• پپتون: تامین کننده نیتروژن، آمینواسیدها و سایر مواد مغذی ضروری برای رشد میکروارگانیسم‌ها.

• عصاره مخمر: منبع ویتامین‌های گروه B و سایر فاکتورهای رشد برای مخمرها.

• آگار: عامل جامد کننده محیط کشت.

• مواد انتخابی: برخی فرمولاسیون‌های OSA ممکن است حاوی مواد انتخابی دیگری باشند تا رشد برخی از انواع خاص مخمرها را تقویت کنند.

کاربردها

• صنایع غذایی و لبنی: برای شمارش مخمرها در مواد غذایی مانند پنیر، ماست، شیر و محصولات تخمیری.

• کنترل کیفیت: برای ارزیابی کیفیت میکروبی مواد غذایی و اطمینان از عدم آلودگی به مخمرها.

• تحقیقات میکروبیولوژی: برای جداسازی و شناسایی گونه‌های مختلف مخمر.

مزایای استفاده از OSA

• انتخابی بودن: محیط OSA به طور خاص برای کشت مخمرها طراحی شده است و رشد بسیاری از باکتری‌ها را مهار می‌کند.

• غنی بودن: حاوی مواد مغذی فراوان برای رشد مطلوب مخمرها است.

• سادگی استفاده: آماده‌سازی و استفاده از این محیط کشت ساده است.

روش استفاده

1. آماده‌سازی محیط کشت: پودر محیط کشت را در آب مقطر حل کرده و طبق دستورالعمل سازنده اتوکلاو کنید.

2. کشت نمونه: نمونه مورد نظر (مثلاً پنیر، شیر) را به صورت سریالی رقیق کرده و سپس روی سطح محیط کشت کشت دهید.

3. انکوباسیون: پلیت‌های کشت شده را در دمای مناسب (معمولاً 25-30 درجه سانتی‌گراد) به مدت 2-5 روز انکوبه کنید.

4. شمارش کلنی‌ها: پس از انکوباسیون، کلنی‌های مخمری را شمارش کنید.

تفسیر نتایج

• کلنی‌های مخمری: معمولاً به صورت کلنی‌های صاف، براق و کرم رنگ مشاهده می‌شوند. ممکن است برخی گونه‌ها کلنی‌های رنگی یا دارای بافت‌های مختلف داشته باشند.

• تفسیر نتایج: تعداد کلنی‌های شمارش شده نشان دهنده تعداد مخمرهای موجود در نمونه است. برای شناسایی دقیق گونه‌های مخمری، نیاز به انجام آزمایش‌های تکمیلی است.

نکات مهم

• کنترل کیفیت: برای اطمینان از کیفیت محیط کشت، از سویه‌های کنترل مثبت و منفی استفاده کنید.

• انکوباسیون: دمای انکوباسیون و مدت زمان آن بسته به نوع نمونه و گونه‌های مورد مطالعه ممکن است متفاوت باشد.

• تفسیر نتایج: برای تفسیر دقیق نتایج، نیاز به دانش میکروبیولوژی و تجربه است.

در چه مواردی از OSA استفاده می‌شود؟

• صنعت لبنی: برای کنترل کیفیت محصولات لبنی مانند پنیر، ماست و شیر.

• صنعت نوشیدنی: برای بررسی آلودگی آبجو، شراب و سایر نوشیدنی‌های تخمیری به مخمرها.

• صنعت دارویی: برای تولید برخی از محصولات دارویی که از مخمرها به دست می‌آیند.

• تحقیقات میکروبیولوژی: برای مطالعه فیزیولوژی و ژنتیک مخمرها.

Orange Serum Agar به طور خاص برای جداسازی و شمارش میکروارگانیسم هایی که قادر به زنده ماندن در محصولات مرکبات هستند توسعه داده شد.
 pH پایین این محصولات رشد میکروارگانیسم ها را به آنهایی که قادر به تحمل محیط اسیدی هستند محدود می کند.
ارگانیسم هایی که در آب مرکبات غلیظ و منفرد رشد می کنند، باکتری های اسید لاکتیک و اسید استیک، مخمرها و کپک ها هستند.  از این گروه از ارگانیسم‌ها، باکتری‌های اسید لاکتیک عمدتاً به‌عنوان عامل فساد شناخته شده‌اند و این باکتری‌ها به‌عنوان لاکتوباسیلوس پلانتاروم، لاکتوباسیلوس برویس، لوکونوستوک مزانترویدها و لوکونوستوک دکسترانیکوم3 شناسایی شده‌اند.
در مطالعات مقایسه ای انجام شده توسط مرداک و همکاران ، Orange Serum Agar  در مقایسه با سایر محیط های مورد استفاده برای شمارش کل و تشخیص موجودات فاسد، محیطی برتر بود.

خواص فیزیکی و شیمیایی

شکل ظاهری: جامد بژ تا زرد کم رنگ
PH: 5.3 الی 5.7
انحلال پذیری: محلول در آب 
دمای ذخیره سازی: 2 الی 8 درجه سانتی گراد
سایر اطلاعات در دسترس نیست.

ویژگی های محیط کشت سرم آگار پرتقال (OSA) کیولب

• شناسایی و شمارش دقیق تر میکروارگانیسم های فساد در pH اسیدی
• حاوی کازئین پپتون به عنوان منبع نیتروژن است
• حاوی دکستروز به عنوان منبع کربوهیدرات است

محیط کشت OSA

محیط کشت Orange Serum Agar که به اختصار به عنوان محیط کشت OSA شناخته می شود و ترجمه آن به فارسی Orange serum agar medium نامیده می شود ، محیط کشت OSA یکی از مدل های گوناگون محیط کشت می باشد که دارای فرمول و ساختاری مختلفی از سایر محیط های کشت است. تجربه در یک محیط استفاده می شود.

محیط کشت Orange Serum Agar

محیط کشت سرم نارنجی آگار به عنوان محیطی برای جداسازی و شمارش موجودات پوسیده در مرکبات استفاده می شود. Serum Orange Agar Medium برای جداسازی و شمارش میکروارگانیسم های زنده در محصولات مرکبات استفاده می شود. PH پایین این محصولات رشد میکروارگانیسم ها میکروارگانیسم هایی که به تنهایی در آب مرکبات غلیظ رشد می کنند شامل اسید لاکتیک و باکتری های استیک، مخمرها و کپک ها هستند.این گروه از موجودات عامل اصلی فساد باکتری های اسید لاکتیک هستند و به عنوان Lactobacillus plantarum ، Lactobacillus brevis ، Leuconostoc mesenteroides و Leuconostoc dextranicum 3 شناخته می شوند. مطالعات مقایسه ای مرداک و همکاران. استفاده از محیط های دیگر برای شمارش کل و تشخیص موجودات پوسیده ، ماده بهتری است.

ترکیبات محیط کشت اورنج سرم آگار

دستورالعمل تهیه محیط کشت OSA

• 37 گرم از محیط کشت OSA را در 1 لیتر آب مقطر حل کنید.
• مخلوط را به آرامی بجوشانید تا کاملا حل گردد.
• مخلوط را در ظروف نهایی بریزید.
•  اتوکلاو در دمای 121 درجه سانتی گراد به مدت 15 دقیقه.

تکنیک
1.  محیط را طبق دستور آماده کنید.
2. 1میلی لیتر از نمونه آزمایش را به ظرف پتری استریل اضافه کنید.
3. تقریباً 20 میلی لیتر از محیط خنک شده (50 درجه سانتیگراد) را به هر صفحه اضافه کنید و طبق روش شمارش صفحه مخلوط کنید.
4. در دمای 30 درجه سانتی گراد تکثیر کنید و روزانه تا هفت روز معاینه کنید.
5. تعداد واحدهای تشکیل دهنده کلنی در هر میلی لیتر از مواد آزمایشی را گزارش کنید.
کاربردها
سرم آگار Orange به طور خاص برای جداسازی و شمارش میکروارگانیسم هایی که قادر به زنده ماندن در محصولات مرکبات هستند ساخته شده است.
PH پایین این محصولات رشد میکروارگانیسم ها را محدود به میکروارگانیسم هایی می کند که قادر به تحمل محیط اسیدی هستند.

آماده سازی محیط

• قوطی حاوی پودر محیط کشت اورنج سرم آگار را به خوبی تکان دهید. مقدار ۴۲ گرم از محیط را در ۱ ­لیتر آب مقطر حل کنید.

• در صورت نیاز کمی حرارت دهید تا حل شود.
• در دمای ۱۱۵ درجه سانتی گراد به مدت ۱۵ دقیقه اتوکلاو کنید. از حرارت دادن بیش از حد محیط خودداری کنید.

شرایط نگهداری 

پودر محیط داخل قوطی کاملا در بسته و در دمای زیر ۳۰ درجه سانتی گراد و محیط آماده در دمای ۸-۲ درجه سانتی گراد نگهداری شود. بهترین زمان استفاده تا قبل از تاریخ انقضای درج شده بر روی برچسب محصول است.