جداکننده لنفوسیت (فایکول)

فایکول: ابزاری کلیدی برای جداسازی لنفوسیت‌ها

فایکول یا فیکول-پاک یک محلول با چگالی بالا است که به طور گسترده در آزمایشگاه‌های زیست‌شناسی و پزشکی برای جداسازی انواع مختلف سلول‌های خون، به ویژه لنفوسیت‌ها، استفاده می‌شود. این محلول به دلیل خاصیت چگالی متفاوتی که دارد، امکان جداسازی سلول‌ها را بر اساس چگالی‌شان فراهم می‌کند.

ساختار و عملکرد فایکول

فایکول یک پلی‌ساکارید مصنوعی است که با سدیم دیاتروزوات ترکیب شده است. این ترکیب، محلولی با چگالی بالاتر از پلاسما و کمتر از گلبول‌های قرمز ایجاد می‌کند. هنگامی که خون به این محلول اضافه می‌شود، اجزای مختلف خون به دلیل تفاوت در چگالی، لایه‌های مجزایی را تشکیل می‌دهند.

لایه پلاسما: لایه بالایی که حاوی پروتئین‌ها و فاکتورهای انعقادی است.

• لایه لنفوسیتی: لایه نازکی که بین پلاسما و محلول فایکول تشکیل می‌شود و حاوی لنفوسیت‌ها است.

• لایه فایکول: لایه اصلی با چگالی بالا.

• لایه گلبول‌های قرمز: لایه پایینی که حاوی گلبول‌های قرمز و سایر سلول‌های سنگین‌تر است.

کاربردهای فایکول

• جداسازی لنفوسیت‌ها: مهمترین کاربرد فایکول، جداسازی لنفوسیت‌های T و B از خون محیطی، مغز استخوان و خون بند ناف است. این لنفوسیت‌ها برای مطالعات ایمونولوژی، سلول درمانی و تولید پادتن‌های مونوکلونال استفاده می‌شوند.

• جداسازی سلول‌های تک هسته‌ای خون محیطی (PBMC): فایکول برای جداسازی PBMC که شامل لنفوسیت‌ها، مونوسیت‌ها و سلول‌های دندریتیک است، استفاده می‌شود.

• تهیه سلول‌های بنیادی: برای جداسازی سلول‌های بنیادی خونساز از خون بند ناف.

• مطالعات سرطان: برای جداسازی سلول‌های توموری از خون بیماران سرطانی.

مزایای استفاده از فایکول

• سادگی و سرعت: روش جداسازی با فایکول ساده و سریع است.

• خلوص بالا: با استفاده از این روش می‌توان لنفوسیت‌ها را با خلوص بالایی جداسازی کرد.

• حفظ زنده‌مانی سلول‌ها: فایکول به سلول‌ها آسیب نمی‌رساند و زنده‌مانی آن‌ها را حفظ می‌کند.

• تکرارپذیری بالا: نتایج حاصل از جداسازی با فایکول بسیار قابل تکرار هستند.

نکات مهم در استفاده از فایکول

• توجه به دما: فایکول باید در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد نگهداری شود و قبل از استفاده به دمای اتاق برسد.

• استریل بودن: فایکول باید استریل باشد تا از آلودگی نمونه جلوگیری شود.

• سرعت سانتریفیوژ: سرعت و زمان سانتریفیوژ باید دقیقاً مطابق با دستورالعمل سازنده باشد.

• حجم نمونه: حجم نمونه خون و فایکول باید به نسبت مناسب باشد.

در کل، فایکول یک ابزار بسیار مفید و پرکاربرد در آزمایشگاه‌های زیست‌شناسی و پزشکی است که به محققان امکان می‌دهد تا سلول‌های مختلف خون را با خلوص بالا و به راحتی جداسازی کنند.