محیط کشت bgb

محیط کشت برلیانت گرین براث (BGB)

محیط کشت برلیانت گرین براث (Brilliant Green Bile Broth) یک محیط کشت مایع انتخابی است که به طور گسترده در میکروبیولوژی برای جداسازی و شمارش باکتری‌های گرم منفی، به ویژه اشریشیا کلی (E. coli) و سایر کول فرم‌ها از نمونه‌های مدفوعی و مواد غذایی استفاده می‌شود. این محیط کشت به دلیل وجود ترکیبات خاص، رشد باکتری‌های گرم مثبت و برخی از باکتری‌های گرم منفی را مهار می‌کند و در عین حال شرایط رشد مطلوبی را برای کول فرم‌ها فراهم می‌کند.

اجزای تشکیل دهنده محیط کشت BGB

• پپتون: منبع نیتروژن، ویتامین‌ها و مواد معدنی مورد نیاز برای رشد باکتری‌ها

• لاکتوز: قند قابل تخمیر توسط کول فرم‌ها. تخمیر لاکتوز توسط کول فرم‌ها منجر به تولید اسید و گاز می‌شود.

• نمک‌های صفراوی: این ترکیبات رشد بسیاری از باکتری‌های گرم مثبت را مهار می‌کنند.

• برلیانت گرین: یک رنگ سبز است که رشد بسیاری از باکتری‌های گرم مثبت و برخی از باکتری‌های گرم منفی را مهار می‌کند.

• فنل رد: یک نشانگر pH است که تغییر رنگ می‌دهد تا تولید اسید را نشان دهد.

نحوه عملکرد محیط کشت BGB

• تخمیر لاکتوز: کول فرم‌ها قادر به تخمیر لاکتوز هستند و در نتیجه اسید تولید می‌کنند. اسید تولید شده باعث کاهش pH محیط کشت می‌شود و نشانگر pH (فنل رد) از رنگ قرمز به زرد تغییر می‌کند.

• تولید گاز: برخی از کول فرم‌ها علاوه بر اسید، گاز نیز تولید می‌کنند. تولید گاز در لوله‌های درمفلون نشان داده می‌شود.

• مهار سایر باکتری‌ها: نمک‌های صفراوی و برلیانت گرین رشد بسیاری از باکتری‌های گرم مثبت و برخی از باکتری‌های گرم منفی را مهار می‌کنند و از این رو به عنوان عوامل انتخابی عمل می‌کنند.

کاربردهای محیط کشت BGB

• جداسازی و شمارش کول فرم‌ها: از این محیط کشت برای جداسازی و شمارش کول فرم‌ها در نمونه‌های آب، مواد غذایی، مدفوع و سایر نمونه‌های بالینی استفاده می‌شود.

• تست MPN (Most Probable Number): برای تخمین تعداد کول فرم‌ها در یک نمونه از روش MPN استفاده می‌شود که در آن از محیط کشت BGB استفاده می‌شود.

• تست‌های بهداشتی مواد غذایی: برای ارزیابی کیفیت بهداشتی مواد غذایی و اطمینان از عدم آلودگی آن‌ها به کول فرم‌ها استفاده می‌شود.

مزایای استفاده از محیط کشت BGB

• انتخابی بودن: این محیط کشت به طور انتخابی رشد کول فرم‌ها را تقویت می‌کند و رشد سایر باکتری‌ها را مهار می‌کند.

• سادگی استفاده: آماده‌سازی و استفاده از این محیط کشت بسیار ساده است.

• هزینه مناسب: این محیط کشت نسبت به سایر محیط‌های کشت تخصصی ارزان‌تر است.

محدودیت‌ها

• عدم اختصاصیت کامل: برخی از باکتری‌های غیر کول فرم نیز ممکن است در این محیط کشت رشد کنند.

• تأثیر عوامل محیطی: عوامل محیطی مانند دما و زمان انکوباسیون می‌توانند بر نتایج آزمایش تأثیر بگذارند.

طرز تهیه محیط کشت :

1. 20,6 گرم از پودر محیط کشت را در یک لیتر آب مقطر مخلوط می کنیم.
2. بر روی حرارت خوب مخلوط می کنیم. (یک دقیقه می جوشانیم. )
3. در دمای 121 درجه سانتیگراد به مدت 15 دقیقه اتوکلاومی کنیم.
4.  آن را در دمای 45-50 درجه سانتیگراد سرد می کنیم.
5. سپس داخل پلیت ها توزیع می کنیم.

محیط کشت برلیانت گرین براث

برای شمارش باکتری های کلی فرم غلظت هایی از نمونه به کار می رود که بین 10-50 کلنی در هر صفحه با استفاده از روش ورق پور تولید می کنند.

ترکیب به مدت 18-24 ساعت در 35 درجه سانتیگراد انجام می شود.

کلنی های کلیفرم دارای یک ناحیه مرکزی به شدت قرمز که توسط یک هاله صورتی احاطه شده هستند. زمینه یکنواخت آبی از محیط گونه های سالمونلا که لاکتوز را تخمیر نمی کنند و کلنی های صورتی بی رنگ تا کم رنگ تولید می کنند.

در کل، محیط کشت برلیانت گرین براث یک ابزار ارزشمند در میکروبیولوژی است که برای تشخیص و شمارش کول فرم‌ها در نمونه‌های مختلف استفاده می‌شود.