کیت رنگ آمیزی زیل نلسون

کیت رنگ‌آمیزی زیل-نلسون: برای شناسایی باکتری‌های اسیدفست

رنگ‌آمیزی زیل-نلسون یک روش رنگ‌آمیزی افتراقی است که برای شناسایی باکتری‌های اسیدفست استفاده می‌شود. این باکتری‌ها به دلیل داشتن دیواره سلولی مومی شکل، در برابر رنگ‌زدایی با اسید و الکل مقاومت می‌کنند. مهم‌ترین جنس باکتری‌های اسیدفست، مایکوباکتریوم است که عامل بیماری سل است.

اجزای کیت رنگ‌آمیزی زیل-نلسون:

• فوشین کاربول: رنگ اصلی که به دلیل وجود فنول، توانایی نفوذ به دیواره سلولی مومی شکل باکتری‌های اسیدفست را دارد.

• الکل اسید: مخلوطی از الکل و اسید که برای رنگ‌زدایی باکتری‌های غیر اسیدفست استفاده می‌شود.

• متیلن بلو: رنگ زمینه که برای رنگ‌آمیزی باکتری‌های غیر اسیدفست به کار می‌رود.

مراحل رنگ‌آمیزی زیل-نلسون:

1. تهیه گسترش: نمونه (معمولاً خلط) روی لام پخش شده و خشک می‌شود.

2. فیکس کردن: گسترش با حرارت یا متانول فیکس می‌شود.

3. رنگ‌آمیزی با فوشین کاربول: گسترش با فوشین کاربول رنگ‌آمیزی شده و به مدت 5-10 دقیقه حرارت داده می‌شود (روش گرم).

4. شستشو: گسترش با آب شسته می‌شود.

5. رنگ‌زدایی با الکل اسید: گسترش با الکل اسید شستشو داده می‌شود تا زمانی که رنگ بیشتری از لام خارج نشود.

6. رنگ‌آمیزی زمینه با متیلن بلو: گسترش با متیلن بلو رنگ‌آمیزی شده و به مدت 30 ثانیه نگه داشته می‌شود.

7. شستشو و خشک کردن: گسترش با آب شسته شده و در هوا خشک می‌شود.

8. مشاهده زیر میکروسکوپ: لام در زیر میکروسکوپ مشاهده می‌شود. باکتری‌های اسیدفست به رنگ قرمز و باکتری‌های غیر اسیدفست به رنگ آبی دیده می‌شوند.

اهمیت رنگ‌آمیزی زیل-نلسون:

• تشخیص بیماری سل: این روش برای تشخیص مستقیم مایکوباکتریوم توبرکلوزیس در نمونه‌های بالینی مانند خلط استفاده می‌شود.

• شناسایی سایر باکتری‌های اسیدفست: علاوه بر مایکوباکتریوم، برخی دیگر از باکتری‌های اسیدفست مانند مایکوباکتریوم لپره نیز با این روش قابل تشخیص هستند.

نکات مهم:

• حرارت: مرحله حرارت در رنگ‌آمیزی با فوشین کاربول برای نفوذ رنگ به داخل دیواره سلولی مومی شکل باکتری‌های اسیدفست ضروری است.

• زمانبندی: هر مرحله از رنگ‌آمیزی باید به مدت زمان مشخص انجام شود.

• کنترل کیفیت: برای اطمینان از صحت نتایج، باید از کنترل مثبت و منفی استفاده شود.

رنگ‌آمیزی زیل-نلسون یک روش تخصصی است که نیاز به مهارت و تجربه دارد. انجام این روش در آزمایشگاه‌های میکروبیولوژی مجهز و توسط افراد آموزش دیده انجام می‌شود.